CENP-B is a conserved gene among vegetal species

To explore the CENP-B centromere protein in beans, carrots, onions and potatoes, total RNA was isolated and reverse transcribed by PCR, and the cDNA encoding the CENP-B amino terminus domain amplified using CENP-B oligonucleotides. Blots containing PCR products were hybridized with a nick-translated pG/CNPB probe containing a complete human CENP-B gene. In all the plant species, anti-CENP-B antibodies recognized an 80-kDa protein. A 360-bp sequence encoding for the amino terminus region of the CENP-B protein was amplified by PCR in all the species and the nick translated pG/CNPB probe hybridized with the PCR products. Apparently the CENP-B centromere protein or an equivalent protein is widely distributed in the vegetal kingdom.

Microangiopatía retiniana en el síndrome de anticuerpos antifosfolípido primario. Reporte de un caso / Primary antiphospholipid syndrome and microangiopathy. A case report

Se presenta un caso clínico de una paciente del sexo femenino de 35 años de edad con pérdida brusca de la visión de ojo derecho, sin antecedentes de colangenopatías y clínicamente sana hasta el inicio de su padecimiento. La pérdida de la visión se asoció con una hemorragia en la arteria retiniana de la región temporal, con edema papilar discreto. La fluorangiografía correlacionó con el examen del fondo del ojo. Los estudios de laboratorio mostraron títulos altos de anticuerpos antifosfolípido de clase IgG. Los anticuerpos antinucleares y los estudios de inmunoespecificidad resultaron negativos, al igual que la serología para padecimientos infecciosos. La paciente recibió esteroides y aspirina y progresivamente mejoró el cuadro y los títulos de anticuerpos antifosfolípidos decrecieron después de 45 días de tratamiento. Se presenta este caso como una manifestación del síndrome de antifosfolípido primario

Las láminas nucleares y la cromatina, forman un complejo que es reconocido por una población de anticuerpos anti-DNA nativo / Anti-nDNA antibodies and cross-react with the laminar structures of the nucleus

En el presente trabajo se determinó la afinidad de los anticuerpos anti-DNA por estructuras laminares del núcleo: para ésto se utilizaron sueros de pacientes con lupus que presentaban anticuerpos antinucleares con patrón anular y anti-DNAn. Se realizaron pruebas de fluorescencia en células digeridas con DNasa o con tripsina. La especificidad molecular se estableció por Western blot en extracto de células HEp-2. De 100 sueros probados, 16 resultaron con un patrón anular, siete resistieron la acción de la DNasa y reconocieron una proteína de 70 kDa correspondiente a lámina B. Los resultados de este estudio sugieren que la cromatina perinuclear se encuentra en íntima relación con proteínas de la envoltura nuclear y con las láminas, y que los anticuerpos anti-DNAn reconocen moléculas de ambas estructuras

Ensamble subcelular de la ribonucleoproteína Ro de 60 kDa a los hYRNAs / Subcellular assemble of the ribonucleoproteínas Ro 60 kDa a the hYRNAs

Ro es un complejo molecular de tres ribonucleoproteínas de 60, 54 y 52 kDa de las que la isoforma de 60 kDa está asociada a uno o varios hYRNAs; se sabe que su ensamble ocurre en el núcleo y en forma de complejo Ro/hYRNA es rápidamente exportado al citoplasma. Este trabajo fue diseñado para determinar si la unión de hYRNA es indispensable para la permanencia nuclear de la proteína Ro de 60 kDa. La interacción entre Ro y hYRNA fue estudiada por inmunofluorescencia y Western blot usando células HEp-2 y anticuerpos anti-Ro. La ribonucleoproteína Ro se localizó en los compartimientos núcleo-citoplásmicos con un patrón granular fino. Para definir si la presencia de hYRNA era esencial en la localización nuclear de Ro se realizaron experimentos adicionales de fluorescencia en células digeridas con RNAasa o tripsina con los siguientes hallazgos. La proteína Ro puede detectarse en el núcleo en ausencia de los hYRNAs, en tanto que su presencia citoplásmica necesariamente está ligada a los hYRNA, ya que la digestión con RNAasa abolió su expresión en citoplasma. El patrón de fluorescencia citoplásmico fue restaurado al reconstituír las células con extractos celulares ricos en hYRNAs. La digestión con tripsina eliminó por completo los gránulos núcleo-citoplásmicos de Ro. Se puede concluir que existen dos pooles nucleares de ribonucleoproteína Ro de 60 kDa, libre y en complejo, en tanto que en el citoplasma solamente existe formando complejos con los hYRNAs

Idiotipos y antiidiotipos: estructura y función en autoinmunidad / Anti-idiotypes and idiotypes: structure and autoimmunity function

Se presenta una revisión sobre la estructura de las inmunoglobulinas y los idiotipos que constituyen las regiones hipervariables que unen al antígeno; según la teoría de jerne, un idiotipo genera otro anticuerpo (antiidiotipo) que reconoce los epitopos de las regiones hipervariables, creando una red que en teoría regula la síntesis de anticuerpos. Funcionalmente existen dos clases: 1) Los idiotipos que constituyen imágenes internas del sitio de unión con el antígeno y 2) Los que reconocen sitios diferentes. Cuando los idiotipos son compartidos por individuos de una misma especie se denominan públicos y son generados vía línea germinal, y los que están presentes en un solo individuo corresponden a idiotipos privados y son producto de mutación somática. En autoinmunidad los idiotipos identifican autoanticuerpos patogénicos órgano-específicos como en pénfigo o penfigoide; éstos son capaces de inducir directamente lesión tisular, que es reproducible en animales. Los órgano-inespecíficos como los autoanticuerpos antinucleares de lupus, generalmente no inducen lesión directa. Finalmente, se revisan las evidencias y modelos experimentales que sugieren que un idiotipo autoinmune humano inyectado en un animal genera un antiidiotipo, que simula al antígeno, este genera un tercer anticuerpo idéntico al autoanticuerpo humano y los animales desarrollan síntomas similares a los observados en padecimientos autoinmunes como lupus

Aspectos moleculares y metodológicos en la determinación de los anticuerpos anti-citoplasma de neutrófilos (ANCA) / Molecular characteristics and metodologics in the diagnostic of anti-neutrophil cytoplasm antibodies

Los anticuerpos ANCA son marcadores serológicos específicos de la granulomatosis de Wegener y están presentes en más del 71 por ciento de los pacientes. Los sueros inducen un patrón de fluorescencia citoplásmica en los gránulos azurófilos de los neutrófilos humanos; el antígeno corresponde a proteinas-3, con peso molecular de 29 KD. Los anticuerpos ANCA pueden detectarse por inmunofluorescencia indirecta, por Western blot y ELISA, usando extractos crudos o purificados de neutrófilos. ANCA es una prueba diagnóstica y pronóstica de la enfermedad. Se revisan las características generales y moleculares del antígeno

Lupus y embarazo: el papel de la placenta en la transferencia de autoanticuerpos / Plancental abnormalities in lupus erythematosis and pregnancy in the deposition of autoantibodies

Se analizan las alteraciones placentarias en lupus y embarazo, los cambios histológicos más frecuentes se observan a nivel vascular. En relación a la fisiopatología, se destaca la participación de múltiples factores, entre los que predomina el depósito de autoanticuerpos y complejos inmunes en el trofoblasto y la decidua. La placenta regula la transferencia de autoanticuerpos maternos al feto; cuando eventualmente se transfieren anticuerpos anti-Ro, potencialmente pueden inducir lupus neonatal. Se analiza un modelo murino para el estudio de la transferencia trasplacentaria de autoanticuerpos en lupus

Interacción de la interleucina-6 y el factor de necrosis tumoral- Ó con la proteína C-reactiva y el amiloide sérico en el proceso inflamatorio de la artritis reumatoide / Interactions of OL-6 and TNF in the production of acute phase proteins in rheumatoid arthritis

Se revisa la importancia de IL6 y TNF en la producción de proteínas reactantes de fase aguda y sus posibles interacciones en el proceso inflamatorio en artritis reumatoide, donde la membrana sinovial, es infiltrada por células, y los macrófagos producen IL-1, TNF-Ó e IL-6. La secreción local de citocinas, aumenta su concentración plasmática. Posteriormente en hígado, IL-6 promueve la transcripción de los genes de las proteínas de fase aguda; incrementando los niveles de PCR, amiloide y otros reactantes en el suero. En la fase crónica, las citocinas inducen daño al cartílago articular y la formación de panus

Análisis peptídico de las proteínas Ro (SSA) y La (SSB) / Peptide analysis of proteins (RO) (SSA) and LA (SSB)

Se obtuvo extracto total de bazo humano (EBH), purificado por cromatografía de intercambio iónico (DEAE) y filtración molecular; la actividad biológica de las proteínas Ro y La en cada uno de los pasos de purificación fue determinada por pruebas de precipitación en gel e inmunoelectrotransferencia, utilizando sueros monoespecíficos anti-Ro y anti-La. La fracción obtenida en filtración en gel fue sometida a electroforesis en geles de poliacrilamida en condiciones reductoras, las bandas proteicas correspondientes a las proteínas Ro y La fueron eluídas de los geles. El análisis peptídico de las proteínas eluídas fue realizado mediante precipitación con acetona, oxidación, tripsinización, danzilación y separación en cromatografía de capa fina, identificándose con luz UV tres péptidos para Ro y cuatro para La. El contenido relativo de aminoácidos se realizó precipitando las proteínas Ro y La, hidrolizándolas con HCL, esterificándolas y acilándolas para ser inyectadas en un cromotógrafo de gases, permitiendo identificar en la proteína La los animoácidos: alanina, glicina, leucina, serina, ácido aspártico, fenilanina, lisina y arginina, y en la proteína Ro: alanina, glicina, leucina, serina, ácido aspártico, ácido glutámico, fenilalanina, lisina, arginina, valina e isoleucina

Especificidad molecular a proteínas CENP en sueros anti-centrómero / Molecular specificity to CENP proteins in anti-centromere sera

Se estudió la reactividad molecular a proteínas CENP, en sueros con especificidad anticentrómero, utilizando extractos de células HEp-2, por la técnica de Western blot, las bandas inmunorreactivas se revelaron por autorradiografía. En 1691 sueros en los que se determinaron anticuerpos, por inmunofluorescencia indirecta, 11 resultaron con patrón anti-centrómero, de éstos, siete reconocieron bandas de CENP en w. blot, los antígenos más frecuentes detectados fueron CENP-B y CENP-C. El estudio a nivel molecular constituye una alternativa fina para la determinación de la especificidad de los autoanticuerpos

Producción y análisis de proteínas recombinantes obtenidas de la cepa lisogénica Ro-531

La expresión del cDNA que codifica al antígeno Ro, fue evaluada usando la clona Ro=531 gt11 cuyos productos de traducción fueron inmunorreconocidos por un suero anti-Ro. La producción de proteína Ro recombinante, fue inducida en la cepa lisogénica E. coli Y1089. La antigenicidad de la proteína fue probada por Western blot y por ELISA. En la primera prueba, 15 de los 20 sueros anti-Ro positivos presentaron fuerte reactividad a la proteína de funsión Ro y 4 de los 20 sueros controles, mostraron reactividad débil. Por la técnica de ELISA, se observó una reacción más específica, ya que 15 de los 20 sueros anti-Ro positivos exhibieron afinidad por la proteína Ro recombinante y ninguno de los controles presentó falsos positivos

Clonación molecular de Ro/SSA de 60 kD

Se identificaron 12 clonas del cDNA que codifica para el antígeno Ro de 60 KD, utilizando una biblioteca de cDNAs de bazo humano normal insertada en fagos gt11, sus productos de traducción inmovilizados en filtros recombinantes fueron reconocidos exclusivamente por un suero anti-Ro; otros sueros con diferentes especificidades, resultaron negativos. Dos de estas clonas fueron estudiadas con mayor detalle: Ro-531 y Ro-832, ambas fueron amplificadas por PCR y solamente Ro-531 fue subclonada en el polylinker pBK-II; el análisis con enzimas de restricción reveló que el ingerto tiene una longitud aproximada de 1 kb. Por transcripción in vitro se sintetizó una sonda de cRNA que hibridó por Southern blot con el DNA de Ro-531, de los lisógenos Y1089/Ro.531, y de pBK-II/Ro.531, pero no con Ro-832. En síntesis, se ha aislado un fragmento que corresponde al 55 por ciento del gene, que codifica para el antígeno Ro de 60 KD(AU)**********ojo

Topography of Ro/SSA and La/SSB proteins during different phases of the cell cycle, studied in murine lymphoblastoid cell lines

Os autores utilizaram técnicas de imunofluorescência para estudar a topografia de proteínas Ro e La em células linfoblastóides sincronizadas de murinos utilizando soro humano mono-específico anti-Ro/SSA. Durante a fase S di cucki celular, o Ro/SSA foi visto como um salpicado grosso no núcleo e no citoplasma. Na fase M, o Ro/SSA apareceu no corpo celular como um padräo reticulado e ficou menos nítido na fase G1. Por outro lado, o La/SSB foi observado durante todo o ciclo celular. Na fase G1, o La/SSB foi visto no nucléolo; na fase S, no núcleo, como um padräo salpicado fino, e na fase M, o padräo salpicado permaneceu em todo o corpo celular. Essas observaçöes indicam que o Ro/SSA é expresso durante as diversas fases do ciclo celular e sugerem, ainda, a dependência celular desse antígeno

Efecto inhibitorio de la endocitosis en leucocitos polimorfonucleares causado por talidomida / Inhibitory effect of endocytosis in polimophonuclear celis caused by thalidomide

La talidomida es un medicamento útil para el tratamiento de la lepra lepromatosa reaccional y se conoce parcialmente su mecanismo de acción. Para entender mejor las propiedades de este fármaco se estudió la función fagocítica de los polimorfonucleares en presencia de talidomida. Los resultados indican que este fármaco disminuye de manera significativa la fagocitosis in vitro y, probablemente mediante el mismo mecanismo, ayuda a disminuir el proceso inflamatorio de la reacción leprosa y otras enfermedades inflamatorias de la piel